免疫胶体金技术自诞生以来便以其简便、特异敏感等优点被广泛应用于检测和现场诊断,显示出巨大的发展潜力和广阔的应用前景。胶体金免疫技术在实际研究及应用过程中仍存在一些不足之处: 先,该方法在检测过程中常出现假阳性和假阴性问题;其次,检测的灵敏度及可重复性程度不高,检测范围需要进一步扩展; 后,因免疫胶体金技术是以胶体金纳米颗粒作为标记物,颗粒本身的一些特性也导致免疫胶体金技术的应用受到限制,如在操作过程中要求清洁程度高,胶体金溶液的稳定性较差,存放时问短,胶体金颗粒大,渗透能力较差等。
免疫胶体金技术应在解决这些问题的基础上向以下几方面发展:进一步提高金标试验的敏感性、特异性、实现多元检测、实现定量或半定量检测是未来金标免疫试验发展的方向,具体包括:
,提高胶体金质量。进一步完善免疫胶体金的制备工艺,使之标准化、程序化,以利于提高检测准确性和可重复性,从而减少假阴性(假阳性)结果的产生。
,进一步提高检测灵敏度。为放大特异性抗原抗体的反应信号,增强胶体金的显色效果,可采用生物素亲和索系统(BAS)或免疫金银染色法(IGss)等措施,并结合一些相应的生物传感器、电化学设备来拓宽其检测范围。TANG等基于铂金电极修饰的胶体金提高了生物传感器检测HABS表面抗体的敏感性和稳定性;KITANO等用基于胶体金表面等离子共振效应的电感受器测定胃蛋白酶的亲和常数。
第三,实现多元检测。可采用多膜复合或单膜多元受体固定2种方式,一次检测可同时多组结果,节省检测时间及成本,这对于检测某些具有联检意义的物质具有很大的应用价值。BUECHLER等用一膜包被多元抗体带的方法研制出了可同时检测乙型表面抗原、艾滋病病毒抗体和抗原及丙型抗体的免疫层析试纸条,多元检测在兽医检测上的应用还值得期待。
第四,实现定量测定。目前,免疫胶体金技术定量检测有3种类型:第1种是通过试纸条的颜色深浅的视觉比较将结果分为阴性、弱阳性、中阳性和强阳性;第2种是将检测线的反应剂设计成只能结合已知量的分析物,任何过量的分析物将会和下一条检测线结合,产生一个温度计式的条带梯度;第3种是应用反射的光密度计测量显色带或斑点的颜色强度,将颜色强度转化为数字指标。前两种检测方法虽简便,但只能提供半定量结果,第3种检测方法虽能实现定量检测,但需的仪器,操作不便。新的、简便实用的定量检测技术的实现将使免疫胶体金技术在毒素检测上 为广泛的应用。
总之,免疫胶体金技术是继三大标记技术之后,又一较为成熟且已广泛应用的免疫标记技术。在今后的研究中,免疫胶体金技术将 进一步显示其巨大的优越性,同时也将在 为广阔的内发挥其作用。