胶体金在水产动物药物残留检测中的应用

　　近年来，随着水产养殖规模的扩大和产量的不断增多，及一些化学合成被广泛用于的防治，或添加于饲料中以水生动物的生长。在发挥积极作用的同时，部分或其代谢产物则残留在水生动物的体内，产生了水产品的残留。虽然水产品的残留量较低，但是通过食物链的长期富集，对人类健康却具有很大的危害，并己成为人类健康的一大隐形杀手。
　　四环素类是一种广谱，该类滥用可引起其在动物的肌肉、奶、肝脏中的残留，严重危害人类健康。檀尊社等将抗四环素单克隆抗体一胶体金复合物包被在胶体金结合垫上，并将人工合成的四环素抗原包被在硝酸纤维素的检测线(T线)，采用免疫竞争法建立了用于检测水产品中四环素类残留含量的胶体金免疫层析检测试剂条。其灵敏度可达100ng/mL，整个检测过程仅需5~10min，并且与金霉素、土霉素、霉素等四环素族有的交叉反应，而与沙丁胺醇、莱克多巴胺等其他兽药无交叉反应。因此可同时检测四环素族中几种主要，并可作为四环素残留现场监控的筛检手段。
　　氯霉素是一种   广谱，常用于动物各种传染性的。但其对人体有严重的毒副作用。目前美国和欧共体己禁止在食用性动物中使用氯霉素，并规定在动物源性食品中不得检出。张燕等用氯霉素多克隆抗体标记胶体金，将人工合成的氯霉素抗原包被在NC膜的检测线上，羊抗兔抗体包被在指控线上，采用竞争法建立了检测淡水鱼及牛乳中的氯霉素残留方法。灵敏度可达1μg/L，并且与其他常见兽药均无交叉反应，可作为水产品中氯霉素残留现场大量筛选的手段。鉴于此有学者用ELISA和GICA检测方法对水产品种氯霉素残留进行了检测。经测定，GICA的检测限为1.000μg/kg，对ELISA的阴性符合率为94.7%，阳性符合率为92.3%，总符合率达到92.5%，基本满足适合水产品中氯霉素残留的现场筛选的要求。
　　硝基呋喃类(Nitrofurans)是人工合成的广谱，主要包括呋喃唑酮、呋喃西林、呋喃妥因和呋喃它酮，曾经被广泛用于在畜禽、水产养殖中防治性和提高饲料利用率。但近年来研究显示，硝基呋喃类及其代谢物存在致癌致突变的危害，严重危害人类健康。柳爱春等在酸性条件下，以4-拨基苯甲醛为衍生化试剂分别与4种硝基呋喃类代谢物(AOZ、SEM、AMOZ和AHD)反应制成相应半抗原：CPAOZ、CPSEM、CPAMOZ和CPAHD，采用碳二亚胺法将半抗原与牛血清蛋白偶联合成人工抗原：CPAOZ-BSA、CPSEM-BSA、CPAMOZ-BSA和CPAHD-BSA，在此基础上研制成4种硝基呋喃代谢物胶体金试剂条，   低检出限分别为0.5、1.0、1.0和2.0μg/kg，相互间的交叉反应率小于0.1%。Xu和Liu等采用免疫竞争法建立了用于检测动物源性呋喃妥因残留的胶体金免疫层析试纸条，该试纸条具有较高的特异性，其灵敏度为10ng/mL，在15min之内就能检测到结果，成本低，方便，，尤其适合在野外的现场检测。
　　磺胺类(SulfonamIdes)是一类用于预防与感染性的化学性。目前中国、欧盟、美国、日本等   均将磺胺类列为动物饲养过程中限制使用的。韩静，刘恩梅等将对磺胺类具有广谱特异性的多克隆抗体一胶体金复合物喷涂在玻璃纤维上，并将人工合成的包被抗原(SAs-OVA)、羊抗兔二抗分别固定在NC膜的T线和C线上，采用免疫竞争法建立了一种用于检测动物源性食品中五种磺胺类，磺胺异噁唑(SIZ)、磺胺噻唑(STZ)、磺胺对甲氧嘧啶(SME)、磺胺甲二唑(SMT)，磺胺氯哒嗪(SCPA)残留的胶体金免疫层析方法。该方法可检测卿鱼肉中磺胺类的残留，检测限为0.01μg/kg，检测时间小于10min，可作为磺胺类多残留现场监控的筛检手段。王钱等同样采取竞争法建立了一种检测组织样品中磺胺甲噁唑残留的胶体金试纸条，灵敏度可达20μg/L，检测时间仅为3~5min，可作为组织中磺胺甲噁唑残留现场监控的筛检手段。
　　氟喹诺酮类(fhtomquinolones，FQs)药是一类人工合成药，己经成为水产养殖中普遍使用的   抗感染之一，被广泛应用于各种水产动物的预防和。冯婷婷等用胶体金标记抗氟喹诺酮类的广谱性单克隆抗体，将诺氟沙星-卵清蛋白喷涂在检测线上，羊抗小鼠二抗喷涂在质控线上，建立了一种检测能同时检测环丙沙星、恩诺沙星等11种氟喹诺酮类的胶体金试纸条，满足了在虾和鸡肉中氟喹诺酮类残留现场大量筛查的要求。
　　孔雀石绿(MG)，在水产上常用作水霉病、鳃霉病、小瓜虫病等，但由于其具有高毒素、高残留和致癌、致畸、致突变等副作用，2002年我国己将孔雀石绿列为水产养殖禁用。但由于其廉，且尚无较好的替代药，目前仍有许多养殖户在违规使用。桑丽雅等采用竞争法，即用胶体金标记孔雀石绿单克隆抗体，将人工合成的包被抗原(MG-OVA)和羊抗鼠哪分别包被在NC膜的检测线和质控线上，建立了检测水产品中孔雀石绿残留的胶体金试纸条，该试纸条对水产品中孔雀石绿和隐性孔雀石绿的   低检出限分别为1μg/kg和3μg/kg，检测结果与液相一串联质谱法的检测结果一致，满足基层现场检测中的需要。赵春城等同样采用竞争法建立了孔雀石绿代谢物一无色孔雀石绿的胶体金试纸条，   低检出限为20μg/L，但与孔雀石绿有20%的交叉反应率。与ELISA试剂盒检测结果的符合率为90%，基本满足现场检测的需要。