1、免疫印迹
免疫印迹是将聚丙烯酞胺凝胶电泳分离的蛋白质区带转移至硝酸纤维素膜,然后用酶免疫法(或免疫荧光、RIA)进行定量分析。同理,金标卡壳免疫胶体金也可用于免疫印迹,将转移后的硝酸纤维素膜与特异性的抗体保温后,再与葡萄球菌曰堪麦白致敏的胶体金反应,洗去多余的胶体金,根据膜上胶体金颗粒颜色深浅推测样品中特异性抗原的多少。金标卡壳胶体金免疫印迹技术简便、且有相当高的灵敏度,在临床免疫诊断上具有很大的应用潜力。
2、免疫金电镜
免疫金电镜的应用己经由对组织细胞定位研究,进一步深入到了基因转录水平、基因表达检测、染色体基因定位、特定核酸序列在细胞内的空间分布分析及核酸复制过程中的定性或定量分析等。胶体金标记抗地高辛抗体的非同位素核酸探针技术,在核酸测定、PCR产物分析及原位杂交等分析方面用处很大。近年来,链霉亲和素一胶体金探针在原位杂交及免疫细胞化学研究中崭露头角,不但可在染色质和染色体上进行DNA序列超微结构水平的 定位,而且可用于哺乳动物组织成长、相关、病毒基因型和表现型的实验室诊断,己成为一种具有广阔应用前景的新型细胞化学检验试剂。
3、流式细胞仪
应用荧光素标记的抗体,通过流式细胞仪计数分析细胞表面抗原,是免疫学研究的重要技术之一。Boehmer等发现,胶体金可以改变红色激光的散射角,他们将胶体金标记的羊抗鼠IgG体应用于流式细胞术来分析不同细胞的表面抗原。结果发现,小鼠的脾细胞可同时被与荧光素和胶体金结合的抗体所标记,两者互不干扰。因此,胶体金可作为多参数细胞分析和分选的标记物,分析各类细胞表面标志滚面受体和表面抗原玛细胞内含物。
4、诊断
免疫胶体金诊断技术是基于酶联免疫
吸附试验、乳胶凝集试验、单克隆抗体技术、免疫胶体金技术和新材料技术的,具有便捷、灵敏、 、成本低等特点,在诊断中推广,己日趋成熟。1980年,Leuvering 早报道了用胶体金检测人绒毛膜促性腺(hCG)的凝集试验。之后,1985年商品试剂盒研制成功,从此胶体金成为免疫学测定方法研究的新热点。新的方法和试剂盒层出不穷,主要应用于和残留检测,相关蛋白、抗原或抗体检测。该技术结合信号放大系统可以对微量物质进行定量检测,也可以同时对多种对象进行检测,对具有联检意义的物质具有很大的应用价值。
5、生物传感器
近年来,金标记被引入生物传感器中的应用研究不断增多。Kim通过交流电导法检测了在叉指电极上的金标记的免疫凝集,从而实现了胶体金免疫层析试验的电化学检测方法,并且通过在胶体金上包被导电聚苯胺,提高电导法测定金标免疫反应的灵敏度。Brainina在胶体金标记A蛋白的基础上,制作了诊断森林脑炎的电化学免疫传感器,用于测定血清中的森林脑炎抗体及其浓度。
6、其他方面
①作为免疫原性物质。2004年,Dykman对胶体金颗粒的免疫原性进行了试验研究,用胶体金作为半抗原的载体来免疫试验动物,发现胶体金有直接免疫佐剂活性,可以增强非特异性免疫反应,提高血液中溶菌酶的浓度、补体活性、吞噬作用和作用。此外,以胶体金一半抗原作为免疫原同抗原一样,无需弗氏佐剂即可诱导抗体的形成,且与用弗氏佐剂相比抗原用量少。②作为免疫增强佐剂。2003年,Zhao将各胶体金颗粒和编码日本脑炎病毒PrM-E蛋白的质粒混和接种小鼠,可增强诱发抗病毒蛋白和保护性免疫反应的产生。这种方法可用于抗日本脑炎病毒的新型DNA疫苗。同年,Zhang等发现,金颗粒作为佐剂对DNA疫苗的电穿孔扩张有免疫增强作用。③作为载体。Paciott等研究了金颗粒在体内传送的作用,发现胶体金颗粒在小鼠体内可引导坏死因子(TNF)到达实体瘤。PT(硫醇化的PEG)-Au重组TNF复合物与的TNF相比毒性 小、可 的减小,而且用 少剂量的获得 大的抗效应。