金标卡板胶体金的原理及特点

　　金标卡板免疫胶体金标记技术是以胶体金作为示踪标志物，应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。胶体金颗粒之间，靠静电作用形成一种稳定的胶体状态，也称金溶胶。金标卡板胶体金标记就是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。吸附机理是胶体金颗粒表面的负电荷与蛋白质的正电荷基团静电吸附而形成牢固结合。用还原法可以方便地通过氯金酸制备各种不同粒径，不同颜色的胶体金颗粒这种球形的粒子对蛋白质有的吸附功能，可以与葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白、毒素、糖蛋白、酶、、、牛血清白蛋白多肤等非共价结合，因而在基础研究和检验检疫中成为非常有用的工具。胶体金是通过在氯金酸水溶液中加入还原剂使之还原并聚集形成胶体金粒子而形成的，通过改变还原剂的种类和剂量，可以控制所还原出的粒子大小，即粒子的大小取决于反应溶液中还原试剂和还原底物的量。还原剂浓度越高，底物浓度也越高，氯金酸水溶液的还原中心就相应增多，使得产生的胶体金粒子数量增多，体积变小。粒子直径每增加1倍，粒子数量便变为原来的1/8。目前，制备胶体金的方法有许多种，根据时间的先后，依次为抗坏血酸还原法、柠檬酸三钠还原法、乙醛超声波还原法、放射性胶体金法、硼氢化钠还原法、鞣酸-柠檬酸三钠还原法、白磷还原法、改良型白磷还原法和微波制备胶体金法。根据不同的制备方法，可以制备出直径1~500nm的胶体金粒子，但作为免疫标记探针，其直径一般为3~50nm。免疫胶体金颗粒具有高电子的特性，在显微镜下金标蛋白结合处，可见黑褐色颗粒，当这些标记物在相应的配体处大量聚集时，肉眼可见红色或粉红色斑点，因而，可用于定性或半定量的免疫检测。
　　金标卡板免疫胶体金技术是四大免疫标记技术之一，在生物医学等各研究，特别是在诊断学中被广泛应用。该技术与其他三大标记技术，即荧光素、放射性同位素和酶技术相比，有以下特点：①胶体金易制备，廉，成本较低；②胶体金颗粒大小可以控制，颗粒均匀，可进行双重和多重标记，同时检测多种物质；③免疫胶体金对组织细胞的非特异性吸附作用小，具有高度特异性和高敏感性；①不仅可用于光镜，也可用于透射电镜和扫描电镜；⑤胶体金本身有鲜艳的酒红色，检测结果直接用颜色显示，肉眼判断容易，无需仪器设备，直观，特别适合于广大基层单位、医院、野外作业人员以及偏远地区等应用；⑥简化了烦琐的操作过程，地缩短了检测时间，同时也减小了操作误差。