金标卡板胶体金免疫层析技术自诞生以来便以其简便、、特异、敏感等优点被广泛应用于检测和现场诊断上,显示出了巨大的发展潜力和广阔的应用前景。随着胶体金标记对传统三大标记物的替代,胶体金免疫层析技术(GICA)也有逐渐取代ELISA等检测方法的趋势。随着该技术的临床应用,进一步提高胶体金免疫层析试验的敏感性、特异性、实现多元检测、实现定量或半定量检测是未来胶体金免疫层析技术发展的方向。
1、进一步提高检测灵敏度
灵敏度的提高无疑会拓宽胶体金免疫检测技术的检测范围,以下二种方法将成为以后的研究方向:①提高胶体金质量。进一步完善免疫胶体金的制备工艺,使之标准化、程序化,以利于提高检测准确性和可重复性,从而减少假阴性(假阳性)结果的产生。②采用生物素一亲和素系统以及免疫金银染色法(IGSS放大特异抗原抗体的反应信号,增强金标记物的显色效果,提高检测灵敏度,无需仪器设备的支持,将地拓宽胶体金免疫结合试验的检测范围。
2、实现半定量或定量检测
目前,免疫胶体金技术定量检测有3种类型:第1种是通过试纸条的颜色深浅的视觉比较将结果分为阴性、弱阳性、中阳性和强阳性;第2种是将检测线的反应剂设计成只能结合已知量的分析物,任何过量的分析物将会和下一条检测线结合,产生一个温度计式的条带梯度;第3种是应用反射的光密度计测量显色带或斑点的颜色强度,将颜色强度转化为数字指标。前两种检测方法虽简便,但只能提供半定量结果;第3种检测方法虽能实现定量检测,但需的仪器,操作不便。新的、简便实用的定量检测技术的实现将使免疫胶体金技术在兽医检测上 为广泛的应用。
3、实现多元检测
在同一膜上固定多种反应物,即可作多种项目的测定,一次测定可以同时多组的测定结果,实现对多个指标的联检。可进一步减少待检时间,降低检测成本,并集中得出数据。
4、通用试剂的应用
多个检测指标的通用试剂,如在间接法检测中用胶体金标记葡萄球菌蛋白A代替标记抗动物IgG,用于各种抗体的检测,有利于减少非特异性反应,稳定检测试剂的质量。
目前,兽医临床上许多病的诊断方法仍较多地局限于传统的血清学诊断方法,难以适应诊断的要求。近年来,金标卡壳胶体金免疫层析技术以其(仅需几分钟)、准确(特异性强、)、简便(不需要昂贵仪器和人员)、肉眼判读、实验结果易保存等优点,为动物疫病诊断技术提供了新的模式,是未来动物疫病诊断的一个发展方向。相信随着新的标记物和制备方法的发展、标记技术的日趋成熟、单克隆抗体技术和分子生物学技术的广泛应用,胶体金免疫层析技术将会有 为广阔的应用前景,实现 加理想的价值,从而我国畜牧兽医事业的健康、和持续发展。