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    金标卡壳GICA技术动物疾病病毒的检测

    发布时间:2017-06-29发布者:兴源塑胶 

      口蹄疫(FMD)被世界动物卫生组织(OIE)列为A类疾病之   。其病原口蹄疫病毒(FMDV)的O型呈全球流行趋势,其次为A型和AsiaⅠ。蒋韬等建立了检测口蹄疫病毒O、A、AsiaⅠ型的定型诊断胶体金免疫层析方法。用纯化的金标标准株O、A、AsiaⅠ型口蹄疫抗体和羊抗鼠抗体分别包被在纤维素膜上作为检测带和质控带,组装成定型诊断试剂盒。结果显示,所研制的试纸条有较好的灵敏度,可检测到7.8万LD50(1:128倍稀释的乳鼠毒)的病毒量。同时,通过阳性阴性样品进行3次重复检测,其结果完全相同,说明有很好的重复性。在特异性方面,和与口蹄疫临床症状有相似的病原如猪水疤病病毒、水泡性口炎病毒、水泡性疹病毒均无交叉反应。而林彤等建立的AsiaⅠ型口蹄疫病毒胶体金金标卡壳试纸条不与口蹄疫病毒A、O、C型以及猪水疤病病毒发生交叉反应,有良好的特异性。并且与其它传统诊断方法的符合率达98.8%。
      在我国,猪轮状病毒感染相当普遍,刘兆磊等建立的A群猪轮状病毒胶体金免疫层析试纸条的   低检测限为1:32稀释的病毒培养液。不同批次的金标卡壳试纸条的重复检测结果无差异,并且与猪传染性胃肠炎病毒、流行性腹泻病毒不发生交叉反应,具有较好的特异性。
      禽流感(AI)和新城疫(ND)是世界范围内   重要的两个禽类传染病。传统的检测方法较为耗时或需要特殊仪器及专业人员,不利于满足现场快速检测的要求。彭伏虎利用双抗夹心法分别研制了H5、H9亚型禽流感病毒胶体金免疫层析快速检测及鉴别诊断试纸条、禽流感和新城疫病毒胶体金免疫层析快速检测及诊断试纸条。结果表明,所研制的金标卡壳试纸条均不与其它禽类病毒发生反应,有非常强的特异性。同时,还采用一膜包被多种抗体的方法,建立了AIV和NDV快速鉴别诊断试纸条,同样具有较强的特异性和较高的灵敏度,可用于AIV和NDV的检测和鉴别诊断。徐一鸣等研制出了针对H3和H7亚型禽流感病毒的胶体金诊断试纸条。用H3和H7亚型单克隆抗体制备金标抗体。再以纯化的马抗H3和H7亚型AIV多抗和山羊抗鼠二抗分别包被在硝酸纤维素膜(NC)上作为检测线和质控线,制备成胶体金试纸条。经过标准阳性抗原检测,结果与血凝试验、血凝抑制试验、AC-ELISA和RT-PCR方法相符。在特异性方面,与H5和H9亚型AIV标准抗原、病料以及传染性支气管炎、新城疫等抗原均无交叉反应,这说明有较好的特异性。
      鹅副粘病毒(GMPV)病是上个世纪末   发现的鹅的一种烈性传染病,已在多省呈爆发流行。常规检测方法无法在基层广泛使用,因此,建立快速的检测方法显得极为   。王翌等研制了鹅副粘病毒胶体金检测卡,该检测卡可以检测鹅副粘病毒尿囊液。与新城疫Lasota株、孔雀源、鸽源、鸡源新城疫病毒感染的尿囊液出现阳性反应;而与鸡减蛋综合征病毒、传染性法氏囊炎病毒、传染性支气管炎病毒、小鹅瘟病毒鸡胚或鸭胚尿囊液和麻疹病毒、犬瘟热病毒细胞培养物呈阴性反应。