胶体金及金标卡板胶体金标记技术

　　胶体金标记技术是继荧光素、放射性同位素和酶标记技术之后又一重要的标记技术。自1971年Faulk和Taylor   将胶体金标记技术引入免疫组织化学以来，胶体金标记技术了发展，因其具有其他标记技术所没有的特性，正在被广泛地运用于生物医学、临床诊断等。近些年，在胶体金标记技术基础上发展起来的胶体金免疫诊断技术已成为而又敏感的免疫检测技术之一，具有广阔的应用前景。基于酶联免疫吸附试验、乳胶凝集试验、单克隆抗体技术、层析技术、胶体金技术和新材料技术基础上发展起来的胶体金免疫诊断技术在目前的医学检验中主要有两种：斑点免疫金渗滤法和胶体金免疫层析法。而金标卡板胶体金免疫层析技术具有操作简便、、操作人员无需技术培训、无需仪器设备、试剂稳定和便于保存等特点，已成为“床边检验”(PointofCareTesting)的主要方法之一。
　　胶体金是指氯金酸(HAuCl4)在还原剂的作用下聚合成大小的金颗粒，形成带负电的疏水性胶溶液，由于静电作用而形成稳定胶体状态。胶体金溶液中的分散相(金颗粒)大小在1~150nm，属于多相不均匀体系，胶体颜色从橘红色向紫红色过渡。胶体金颗粒由一个基础金核(原子金)及包围在外围的双离子层构成，内层为AuCl2-负离子层，外层为分散在溶液中的H+，由此产生的静电引力维系胶体的稳定状态。胶体金的制备   常用的方法是化学还原法，常用的还原剂有柠檬酸三钠、靴酸、抗坏血酸、硫氰酸盐等。根据还原剂类型和还原作用的强弱，可以控制产生出0.8~150nm的胶体金，还原剂用量越大，制各的金颗粒直径越小。
　　胶体金颗粒具有高电子密度、在弱碱性条件下其表面带有负电荷的特性，能够和蛋白质的正电荷基团牢固地结合在一起。据报道，当金颗粒聚集密度达到1000万个/m㎡，即可出现肉眼可见的粉红色斑点。胶体金标记实际上是蛋白质等高分子物质在胶体金颗粒表面的包被过程。由于金颗粒与蛋白质之间是静电结合，此过程并不影响蛋白质分子的生物学特性。因金颗粒对蛋白有的吸附力，可以与葡萄球菌A蛋白、抗体、毒素、酶、牛血清白蛋白等非共价结合，已成为基础研究和临床实验中的重要工具。