动物源性食品中违禁(如β-激动剂、等)的残留、重金属和生物毒素含量超标已成了困扰世界食品卫生的难题。这些残留不仅影响我国畜禽产品的出口贸易,同时威胁着消费者的健康。许多 以兽药残留监控为技术壁垒,阻止我国畜产品的正常出口。
利用金标卡板免疫胶体金诊断来初测农畜产品中的重金属离子含量,可以节省时间,加快检测进程,提高现场抽查和通关检测的效率。目前,已经建立了针对污染物的免疫胶体金检测方法,并且将该方法用于重金属离子的分析检测,迄今为止,免疫胶体金检测技术已经成功用于水中的锢、汞、福、铅和铀等的检测。
在毒素检测方面,胶体金试纸条也显示出它的优势。赖卫华等研制的胶体金试纸条用以检测赭曲霉毒素A,检测限为10ng/mL。Klewitz等利用胶体金标记技术,分别研制了检测A、B、D、E型肉毒毒素的试纸条,试验的敏感性甚至达到50pg/mL。
近年来,由于 加强对“瘦肉精”克伦特罗的监控,打击了生猪养殖中非法使用“瘦肉精”的行为。但是在养殖业中,“瘦肉精”的替代品莱克多巴胺(RCT)和沙丁胺醇却又悄然兴起。徐社会将莱克多巴胺(CRAC)与BSA偶联制成人工抗原免疫BALB/c:小鼠,通过杂交瘤技术制备了抗RAC单克隆抗体,并利用胶体金免疫层析技术,采用竞争法研制了RAC胶体金免疫层析试纸四。试验表明,该试纸检测灵敏度为5ng/mL,在室温干燥条件下可保存12个月以上,与克伦特罗、肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素、苯氧丙酚胺、沙丁胺醇和多巴胺的交叉反应性都小于0.03%,试纸灵敏度、稳定性、特异性等均达到检测要求。
金标卡壳免疫胶体金技术以其简便,特异性强、敏感性高,肉眼判断,试验结果易保存,无需仪器设备和试剂等优点,这些特点都是其他免疫学方法所无法比拟的。但胶体金免疫技术在实际研究及应用过程中仍存在一些不足之处: 先,该方法在检测过程中常出现假阳性和假阴性问题。其次,检测的灵敏度及可重复性程度不高,检测范围需要进一步扩展。 后,因免疫胶体金技术是以胶体金纳米颗粒作为标记物,颗粒本身的一些特性也导致免疫胶体金技术的应用受到限制,如在操作过程中要求清洁程度高,胶体金溶液的稳定性较差,存放时间短,胶体金颗粒大,渗透能力较差等。免疫胶体金技术应在解决这些问题的基础上向以下几方面发展: 先,进一步提高检测灵敏度,拓宽检测范围。为放大特异性抗原抗体的反应信号,增强胶体金的显色效果,可采用生物素亲和素系统(BAS)或免疫金银染色法(IGSS)等措施,并结合一些相应的生物传感器、电化学设备来拓宽其检测范围。Tangy等基于铂金电极修饰的胶体金提高了生物传感器检测HABS表面抗体的敏感性和稳定性。Kitano等用基于胶体金表面等离子共振效应的电感受器测定胃蛋白酶的亲和常数。其次,实现检测多元化。可采用多膜复合或单膜多元受体固定两种方式,一次检测可同时一组结果,节省检测时间及成本,这对于检测某些具有联检意义的物质具有很大的应用价值。进一步提高免疫金标方法的敏感性、特异性,并实现多元检测、定量或半定量检测是将来该技术发展的主要方向。随着免疫胶体金新的标记物和制备方法的发展,免疫胶体金技术将会有 为广阔的市场和应用前景。